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GST pull-down試劑盒	FI8804，20/40次	Fitgene-FI8804說明書		點擊詢價
His pull-down試劑盒	FI8805，20/40次	Fitgene-FI8805說明書

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GST pull-down試劑盒和His pull-down試劑盒簡介

輝駿生物的GST pull-down試劑盒和His pull down試劑盒能夠高效調(diào)取GST融合蛋白或His融合蛋白在各類樣本中的互作蛋白。

在GST pull-down或His pull down實驗前，先通過基因工程技術(shù)手段將目標(biāo)基因連入帶有GST標(biāo)簽或His標(biāo)簽的原核表達載體中，并導(dǎo)入大腸桿菌中進行原核表達。之后，GST融合蛋白通過GTH（ Glutathione）樹脂純化，His融合蛋白通過Ni-NTA 樹脂純化。最后，加入樣本裂解液孵育，樣本中與GST或His融合蛋白有相互作用的蛋白便可被吸附而分離。分離的蛋白產(chǎn)物既可以用Western blot檢測已知蛋白，也可以用質(zhì)譜（LC-MS/MS）鑒定未知蛋白。

蛋白pull-down試劑盒應(yīng)用

蛋白-蛋白間的相互作用是蛋白質(zhì)發(fā)揮生物學(xué)功能的主要模式，蛋白質(zhì)會通過結(jié)合不同的伙伴來行駛不同的功能，形成復(fù)雜的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)網(wǎng)絡(luò)。以下列舉了可應(yīng)用蛋白 pull down試劑盒的幾個研究方向或研究領(lǐng)域：

1. 確定2個蛋白是否具有直接相互作用；

2. 確定蛋白之間結(jié)合的結(jié)構(gòu)域；

3. 病毒、細菌等病原體侵染宿主細胞的機制；

4. 酶和底物的作用機制；

5. 蛋白調(diào)控復(fù)合體的研究。

GST pull down和His pull down試劑盒組分

蛋白Pull down試劑盒優(yōu)勢

1、調(diào)取效率高：融合蛋白與樹脂親和力強，可以高效純化目標(biāo)蛋白及其互作蛋白；

2、適用范圍廣：優(yōu)化的裂解液配方適用于動物、植物組織、微生物等各類型組織和細胞樣本；

3、洗脫液適配后續(xù)Western Blot及質(zhì)譜（LC-MS/MS）實驗。

4、操作簡便，耗時短，適用于初學(xué)者。

pulldown試劑盒使用流程簡述

1. 通過原核表達系統(tǒng)表達帶有GST標(biāo)簽或His標(biāo)簽的融合蛋白；

2. 在細菌上清液中加入GST標(biāo)簽親和純化樹脂或His標(biāo)簽親和純化樹脂，4 ℃孵育2 小時；

3. 將待測樣本裂解液加入上述體系中，4 ℃孵育過夜；

4. 漂洗、洗脫得到目標(biāo)蛋白及其互作蛋白復(fù)合物。

GST pulldown和His pulldown試劑盒使用案例

GST pull down WB結(jié)果圖（陽性）

His pull down WB結(jié)果圖（陽性）

GST Pull-down MS：Western blot檢測圖

蛋白pull-down MS：質(zhì)譜檢索表格（部分展示）

蛋白pull down試劑盒—客戶文章

1. DSS1 inhibits autophagy to activate epithelial-mesenchymal transition in a pro-metastatic niche of renal cell carcinoma. 2025. Nature Communications.  1區(qū), IF=14.7.

2. Chen S.L. et al: A GYS2/p53 Negative Feedback Loop Restricts Tumor Growth in HBV-Related Hepatocellular Carcinoma. 2018. Cancer Research. 1區(qū), IF=11.2. 

3. Yun F. et al: NOD2 reduces the chemoresistance of melanoma by inhibiting the TYMS/PLK1 signaling axis. 2024. Cell Death Dis. 1區(qū), IF=9.6.

4. Yu C.P. et al: Flot2 acts as a novel mediator of podocyte injury in proteinuric kidney disease. 2023. Int J Biol Sci. 1區(qū), IF=9.2.

5. You H. J. et al: Hepatitis B virus X protein promotes vimentin expression via LIM and SH3 domain protein 1 to facilitate epithelial-mesenchymal transition and hepatocarcinogenesis. Cell. 2021. Commun Signal. 2區(qū), IF=8.4.

6. Lin J.M. et al: A positive feedback loop between ZEB2 and ACSL4 regulates lipid metabolism to promote breast cancer metastasis. 2023. eLife. 1區(qū), IF=6.4. 

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