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Protein A/G磁珠產品信息

Protein A/G 磁珠采用納米表面生物技術將 Protein A/G 高密度定向包被到超順磁性微球表面，磁珠表面具有更多的抗體結合位點， 結合效率高、磁珠用量少、反應快，并且非特異性結合低，可簡單高效的進行目標蛋白的免疫沉淀或免疫共沉淀實驗。
       Protein A/G 免疫沉淀磁珠適用范圍廣泛， 哺乳動物、植物、細菌、酵母、昆蟲等多種生物的細胞或組織裂解液、細胞分泌液上清、血清、動物腹水以及其它的免疫抗原等均適用本產品。

Protein A/G磁珠產品屬性

Protein A/G磁珠使用案例

(1) Input：樣本裂解液；  (2)  IgG：normal IgG的IP產物（對照組）；   (3)  Anti-Bait：誘餌蛋白抗體的IP產物（實驗組）。

Protein A/G磁珠使用方法（參考）

 
1. 抗原樣本制備
（1）將收集好的樣本置于冰上， 每組樣本加入 300~500 μL 預冷的裂解緩沖液，吹打混勻。

（2）a. 動物樣本： 最好冰上超聲至溶液基本澄清； 如果無超聲條件， 可以置于冰上裂解 30 min，間隔手動混勻。
         b. 植物、微生物樣本：冰上超聲破碎至溶液基本澄清。
（3）4℃ 12000 g 離心 15 min，收集上清至新的離心管中，取 30 μL 作為 input，剩余置于冰上備用或- 80℃保存。

2. 免疫共沉淀
(1)  向樣本裂解液中加入適量抗體（按照抗體說明書添加），放混勻儀上 4 ℃ 孵育4 h 或過夜。
(2)  取出 Protein A/G 磁珠， 上下顛倒混勻， 取 30~50 μL 磁珠到新的離心管中。
(3)  加入 200 μL 漂洗緩沖液，顛倒混勻 30 次， 放磁力架上靜置 1 min 并棄上清； 重復該漂洗操作一次。
(4)  向上步磁珠中加入步驟（1）的樣本/抗體混合物，放混勻儀上 4 ℃孵育 1~2 h， 放磁力架上靜置1 min 并棄上清。
(5)  加入 500 μL 漂洗緩沖液，顛倒混勻 30 次，放磁力架上靜置 1 min 并棄上清；重復該操作兩次，共漂洗三次，保留磁珠。

3. 洗脫
(1)  SDS-PAGE上樣緩沖液洗脫法（變性洗脫法）：加入30~50 μL 1×SDS-PAGE上樣緩沖液，95oC加熱5分鐘。放磁力架上靜置 1 min， 收集上清至新的離心管中。 該洗脫液適合于 SDS-PAGE 或 Western Blot 檢測。
(2)  非變性洗脫法：加入 30~50 μL 酸性洗脫緩沖液，渦旋震蕩 20 s，放混勻儀上室溫洗脫 10~15 min，渦旋震蕩20 s； 放磁力架上靜置 1 min，收集上清至新離心管中，并立即滴入占總體積 1/10 體積的中和緩沖液，將洗脫產物 pH 調節(jié)至中性，- 80 ℃保存或直接用于后續(xù)實驗。洗脫后的蛋白保持原有的生物活性，便于后續(xù)檢測（例如SDS-PAGE、Western-blot、質譜實驗等）。

注意事項

1.  本產品僅限于科學研究使用，不得用于臨床診斷或治療。
2.  為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。