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      IP / Pull down Beads一抗分子互作試劑盒分子互作單品基因表達產(chǎn)品二抗
      [FI8303] 鏈霉親和素磁珠
        產(chǎn)品名稱
        貨號
        儲存條件
      其他

        鏈霉親和素磁珠

        FI8303-1mL  4℃(避免凍存),2年


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        鏈霉親和素磁珠  FI8303-5mL  4℃(避免凍存),2年


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      18927549347、13430303037




      鏈霉親和素磁珠產(chǎn)品信息


      輝駿生物的鏈霉親和素磁珠(Streptavidin Magnetic Beads) 采用蛋白偶聯(lián)技術(shù)將鏈霉親和素(SA) 共價偶聯(lián)到超順磁性微球表面, 可高效地結(jié)合生物素化的抗體、核酸、蛋白等配體分子,以及游離生物素。本產(chǎn)品使用簡單, 可保證批次一致性和結(jié)果的可重復性。




      鏈霉親和素磁珠產(chǎn)品屬性


      粒徑1 μm
      磁珠濃度10 mg/mL
      生物素化單鏈寡核苷酸(24nt)結(jié)合量

      ≥ 350 pmol/mg

      生物素化IgG結(jié)合量
      ≥ 15 μg/mg
      應(yīng)用相互作用研究(RNA pull-down,DNA pull-down,生物素藥物pull-down)、免疫檢測、分離核酸等




      鏈霉親和素磁珠使用案例


      (1) Input:樣本裂解液;  (2)  IgG:normal IgG的IP產(chǎn)物(對照組);   (3)  Anti-Bait:誘餌蛋白抗體的IP產(chǎn)物(實驗組)。




      鏈霉親和素磁珠使用方法(參考)

       
      1. 結(jié)合生物素化核酸
      (1)將磁珠瓶置于漩渦振蕩器上 20 s,振蕩重懸磁珠; 取 100 μL 磁珠到新的離心管中,放磁力架上靜置 1 min 并棄上清

      (2)加入 1 mL Wash BufferⅠ 到離心管中,充分振蕩重懸磁珠,放磁力架上靜置 1 min 并棄上清;重復洗滌磁珠一次,共兩次。
      (3)加入 500 μL 的用 Wash BufferⅠ 稀釋的生物素化核酸(使磁珠濃度為 2 mg/mL),充分振蕩重懸磁珠; 將離心管置于旋轉(zhuǎn)混勻儀上,室溫旋轉(zhuǎn)混合 30 min。

      (4)放磁力架上靜置 1 min,將上清液轉(zhuǎn)移至新的離心管。

      (5)按步驟 (2) 的方法洗滌磁珠三次。

      (6根據(jù)后續(xù)實驗的要求,加入合適的低鹽緩沖液,重懸磁珠。


      2. 結(jié)合生物素化抗體/蛋白操作流程
      (1)  將磁珠瓶置于漩渦振蕩器上 20 s,振蕩重懸磁珠; 取 100 μL 磁珠到新的離心管中,放磁力架上靜置 1 min 并棄上清
      (2)  加入 1 mL Wash Buffer Ⅱ 到離心管中,充分振蕩重懸磁珠。 放磁力架上靜置 1 min 并棄上清;重復洗滌磁珠兩次,共洗滌三次。 
      (3)  加入 1 mL Wash Buffer Ⅱ 稀釋的生物素化抗體/蛋白(使磁珠濃度為 1 mg/mL),充分振蕩重懸磁珠。將離心管置于旋轉(zhuǎn)混勻儀上,室溫旋轉(zhuǎn)混合 60 min。
      (4)  放磁力架上靜置 1 min,將上清液轉(zhuǎn)移至新的離心管。

      (5) 按步驟 (2) 的方法洗滌磁珠五次。

      (6根據(jù)后續(xù)實驗的要求,加入 Wash Buffer Ⅱ 或其他合適的緩沖液,重懸磁珠。


      3. 洗脫
      (1)  生物素標記核酸的洗脫: 向磁珠中加入 50-100 μL Elution BufferⅠ, 65℃孵育 5 min 90℃孵育 2 min; 放磁力架上靜置 1 min,收集上清。
      (2)  生物素標記抗體/蛋白的洗脫:有以下兩種洗脫方案,操作者可根據(jù)后期檢測的需要選擇不同的洗脫方法:

      a. 變性洗脫法:洗脫的樣品適用于 SDS-PAGE 檢測。向磁珠中加入 50~100 μL 1 × SDS-PAGE Loading Buffer混合均勻, 95℃ 加熱 5 分鐘。置于磁力架,分離磁珠,收集上清,進行 SDS-PAGE 檢測。
      b. 非變性洗脫法:此方法洗脫的樣品保持原有的生物活性, 便于后續(xù)檢測(例如 SDS-PAGE、 Western-blot、質(zhì)譜實驗等) 。向磁珠中 50~100 μL Elution Buffer Ⅱ,室溫孵育 5~10 min。 放磁力架上靜置 1 min,收集上清至新的 EP 管,并立即滴入總體積 1/10 體積的中和緩沖液(0.1 M NaOH) ,將洗脫產(chǎn)物 pH 調(diào)節(jié)至中性。



      注意事項


      1.  本產(chǎn)品僅限于科學研究使用,不得用于臨床診斷或治療。
      2.  為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。


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